J Ethnopharmacol：基于中性粒细胞胞外诱捕网研究痛风清消方改善痛风性关节炎的机制

背景：中医在中国有几千年的历史。痛风清消方（TFQXF）经煎煮和口服治疗痛风性关节炎（GA）有显著疗效。中医通常被认为是一种经验医学，缺乏现代科学研究，TFQXF的疗效也面临同样的问题。因此，该研究旨在从动物实验、细胞实验、高通量基因测序等方面阐明TFQXF的作用机制。

目的：基于中性粒细胞胞外诱捕网研究TFQXF对痛风性关节炎的改善作用。

方法：单尿酸钠（Monosodium Urate， MSU）干预SD雄性大鼠，以TFQXF给药建立GA模型。21天后：PicoGreen分光光度法检测DNA /中性粒细胞胞外诱捕网（NETs），酶联免疫吸附试验（ELISA）检测髓过氧化物酶（MPO）和中性粒细胞弹性酶（NE）；踝关节滑膜组织：免疫组化检测MPO和NE；逆转录定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot检测MPO、NE、cxcl9和CXCL10基因及蛋白表达水平。

细胞实验：用MSU模型和不同浓度的含TFQXF的血清处理SD雄性大鼠的原代中性粒细胞，观察细胞存活率、活性氧（ROS）水平和凋亡情况；收集细胞培养上清，PicoGreen荧光分光光度法测定DNA / NETs，免疫荧光法测定白细胞介素-6 （IL-6）、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、转化生长因子-β1 （TGF-β1）、MPO和NETs的表达水平。高通量测序和生物信息学筛选关键靶基因，并使用Western blot和RT-qPCR进行验证。

结果：注射TFQXF后，GA大鼠ds DNA / NETs、MPO和NE的表达水平以及滑膜组织MPO、NE、CXCL 9和CXCL10的表达水平均降低。MSU干预促进ROS生成，抑制中性粒细胞凋亡，提高ds DNA / NETs、IL-6、TNF-α表达水平，降低TGF-β1表达，降低MPO和NE的荧光。经含TFQXF血清和双氯芬酸钠干预后，TGF-β1水平升高，其余指标下降。关键基因COL1A1、COL3A1和MMP 2的验证表明，在MSU干预下，其水平升高，而在TFQXF含血清和双氯芬酸钠干预下，其水平下降。

结论：TFQXF可能抑制中性粒细胞募集和NETs释放，减轻炎症，促进GA炎症恢复健康。在应对GA的全球挑战时，中医提供了有价值的参考和观点。

原始出处：

Li H, Yuan Q, Sun W, et al. Investigating the mechanism of Tongfeng Qingxiao Formula for improving gouty arthritis based on the neutrophil extracellular trapping network. J Ethnopharmacol. Published online December 28, 2024. doi:10.1016/j.jep.2024.119304