Cancers (Basel) ：体外共聚焦显微镜对皮肤肿瘤手术的影响研究

非黑色素瘤皮肤癌(Non-melanoma skin cancer, NMSC)是浅色皮肤人群中最常见的肿瘤类型，在过去几十年中发病率稳步上升。基底细胞癌(Basal cell carcinoma, BCC)是最常见的NMSC，占所有角化细胞癌的75%。鳞状细胞癌(SCC)是第二常见的NMSC，占20%。大多数NMSCs可以通过根治性切除或各种局部治疗来治愈。切除可以采用具有标准化安全边界的标准切除，也可以采用显微镜控制手术，绘制肿瘤周界和深部边界，如果有任何肿瘤残留，随后进行逐步再切除。切除后，建议对边缘进行组织学评估。在标准切除(2D)中，肿瘤在多个横截面上进行处理，称为面包块技术。然而，在横切面之间的侧缘，肿瘤残余可能被忽略。对于有高危因素、BCC和SCC的患者，应进行显微控制手术。这两种癌症在显微照相控制手术后复发率都较低。在欧洲，已经建立了两种完整的组织标本周向和深缘处理技术。在Mohs显微摄影手术(MMS)中，术中冷冻切片被评估;在3D组织学中，对石蜡切片进行评估，通常需要患者住院切除并暂时覆盖缺损，同时过夜准备组织切片供病理学家第二天早上分析。根据检查结果，如果手术边缘清晰(R0)，则关闭缺损;如果发现手术边缘残留肿瘤(R1)，则重新切除缺损，再次暂时覆盖缺损，等待重新评估。每次再切除都会延长患者的住院时间，造成并发症(感染、老年人活动能力丧失等)、更高的医疗费用以及难以规划日常手术计划。

离体反射共聚焦显微镜(evRCM)技术可以对切除组织边缘进行即时围手术期评估。RCM允许在深度约200 μ m的细胞分辨率下进行皮肤评估，十多年来一直用于黑素瘤、bcc和SCCs的体内诊断和边缘估计。RCM在诊断BCC和SCC方面具有很高的敏感性和特异性。evRCM使用相同的技术，但允许对切除组织进行围手术期检查。将切除的组织浸入两种荧光染料、蒸馏水和酒精中几秒钟，固定在两个玻璃片之间，根据其大小，在几秒钟到几分钟内从底部扫描。与传统的RCM不同，evRCM使用第二种波长不同的激光，使用荧光染料扫描细胞核和细胞膜。数码染色后，图像类似苏木精-伊红(HE)染色的组织学切片产生。evRCM在实时评估皮肤良恶性肿瘤方面显示出良好的结果，与组织学结果高度一致。它也被用于评估BCC的手术边缘和各种实体肿瘤类型，包括乳腺、前列腺、中枢神经系统、肾脏、膀胱和结膜肿瘤，并取得了良好的效果。evRCM尚未被广泛接受用于NMSCs的手术边缘评估，因为检测小肿瘤区域(如SCC的神经周围生长)有时很困难。此外，由于很难看到表皮，用evRCM扫描皮肤组织提出了一个特别的挑战。与经典RCM一样，evRCM图像可以由皮肤科医生而不是病理学家进行评估。本研究使用evRCM检查先前不完全NMSC切除的患者围手术期再切除，以帮助决定立即再切除或缺损关闭并缩短住院时间。进行手术的皮肤外科医生对evRCM图像进行分析。该研究旨在比较evRCM结果与组织学的有效性，并评估其对患者医学治疗的影响。

方法:由皮肤外科医生使用evRCM评估NMSC再切除，当结果与组织学不同时，由独立病理学家进行回顾性检查。

研究过程

患者及肿瘤特征

交叉表显示evRCM与组织学结果的一致性，以及evRCM的敏感性、特异性和诊断准确性。

组织学图像显示一个直径0.3 mm的浅表BCC巢(红色箭头)。有可能这样的肿瘤残余物不存在于真正的手术边缘，并且不能使用evRCM看到。由于重新切除标本的切片，组织学结果可能是假阳性

当夹在玻璃板之间时，表皮经常向内或向外倾斜。(a)红色箭头所示的亮条纹为向内倾斜的表皮。因此，表皮在evRCM图像中几乎不可见(b)，并且皮下区域可能被遮挡。

硬皮样基底细胞癌evRCM与病理比较。(a)由于evRCM图像对比度较低且缺乏表皮，很难区分硬皮样肿瘤巢和皮肤附件结构。(b)硬皮样基底细胞癌在组织学切片上很容易识别

结果:evRCM具有较高的特异性(0.96;95% CI, 0.90-0.99)，但灵敏度低(0.20;95% ci, 0.06-0.51)。不像病理学，放弃手术外缘，evRCM检查真正的手术边缘。对误诊病例进行回顾性病理分析，25% (n = 2/8)为假阴性，75% (n = 6/8)为潜在假阳性，敏感性为0.2 ~ 0.8。值得注意的是，evRCM使住院时间减少了113天，可能导致患者满意度和成本效益的提高。

结论:evRCM对于加快NMSC再切除患者手术边缘的评估是有价值的。适当的组织准备和评估需要皮肤外科医生、病理学家和医师助理之间的跨学科合作，强调标准化操作程序的必要性。

原始出处：

Frank Friedrich, Gellrich;  Jörg, Laske;  Julian, Steininger;Ex Vivo Confocal Microscopy Speeds up Surgical Margin Control of Re-Excised Skin Tumors and Greatly Shortens In-Hospital Stay.Cancers (Basel) 2024 Sep 20;16(18)