【期刊导读】高敏HBsAg检测：HBsAg Next助力隐匿性HBV感染检出及HBV再激活的早期监测

编者按

HBsAg是预测慢乙肝患者临床和治疗结局的一个可靠的血清学标志物。目前商用的HBsAg检测方法的检测下限（LLOD）为0.05 IU/mL。然而，仍需更灵敏的HBsAg检测方法以加强慢乙肝的临床管理。近来免疫分析技术的进步使HBsAg的检测更加灵敏，如雅培的Alinity i HBsAg Next检测（HBsAgNx），灵敏度为0.0045 - 0.00597 IU/mL，约为目前HBsAg检测方法的8倍。

Journal of Clinical Virology上发表的一篇法国研究评估了HBsAgNx的分析性能特性，研究结果表明：HBsAgNx检测具有良好的分析性能，比标准的HBsAg Qualitative II检测（HBsAgQII）具有更高的灵敏度和特异性，可能有助于HBV感染早期、HBV再激活及隐匿性HBV感染（OBI）的监测，且在所有HBV基因型样本中均有较好的检测能力。

研究方法

纳入圣路易斯大学医院收集的253例血清样本，并分为四组： 

• 第1组：前瞻性常规HBsAg筛查（n = 196），其中164例HBsAgQII阴性，32例HBsAgQII阳性。此外，还探索了HBsAgNx在HBsAg阴性、抗-HBc阳性个体（n = 149）中的可检测性。

• 第2组：HBV再激活（HBV-R）前的回顾性血清样本（n = 18）。

• 第3组：回顾性选择8例OBI患者的血清样本（n = 10）。患者当天的血清样本HBV DNA低水平、HBsAgQII阴性。其中一名患者的血清样本曾在8个月前出现HBsAgQII阳性。

• 第4组：纳入29个野生型HBV基因型样本（n = 29），用于确定HBsAgNx在不同基因型样本中的检测性能。

使用雅培的Alinity i HBsAgQII（灵敏度为0.019 - 0.021 IU/mL）和Alinity i HBsAgNx（0.0045 - 0.00597 IU/mL）进行HBsAg检测。

*中和试验：对于体积足够、HBsAg检测阳性的样品使用HBsAgNext验证试验进行确认，采用特异性抗体中和作用来验证反应性样品中HBsAg的存在。

研究结果

第一组

在196例样本中，163例使用两种HBsAg检测均为阴性，其中，91例抗-HBs和抗-HBc均呈阳性，57例仅抗-HBc阳性，2例仅抗-HBs阳性，13例所有HBV血清学指标均为阴性。

1例患者的HBsAgQII检测为阴性（S/CO = 0.46），而HBsAgNx检测为阳性（S/CO = 5.68，中和率为100 %）。该患者为OBI（HBV DNA：35 IU/mL），且抗-HBc阳性，抗-HBs阴性。

在32例HBsAg阳性的患者中，有25例两种检测均呈阳性，其余7例患者的HBsAgQII检测呈假阳性，HBsAgNx检测为阴性。

第1组样本的分类

尽管存在差异，但两种检测之间的一致性很高，Cohen’s kappa为0.83（95% CI 0.70 - 0.94）。

第1组中两种HBsAg检测均呈阳性的25例患者中HBsAgQII和HBsAgNx之间HBsAg S/CO的对应关系

在第1组的196例患者中，25例（12.7%）可获得HBV DNA数据。其中5例HBsAg阴性，2例HBsAgQII假阳性，这7例的HBV DNA均检测不到。

用于评估HBsAgQII和HBsAgNx两种检测方法的S/CO值之间的相关性的Pearson相关系数为0.70，表明两者存在显著正相关。

HBsAgNx与HBsAg QII检测的Pearson相关系数分析

第二组

小组2由来自11名患者的18份样本组成，这些患者在2018年至2023年期间出现了免疫抑制驱动的HBV-R，大部分患者患有同时影响淋巴系和髓系的血液系统恶性肿瘤。在基线筛查时，所有患者HBsAgQII阴性，抗-HBc阳性，抗-HBs阴性。

在免疫抑制治疗（抗癌药物和糖皮质激素）期间或之后，血清HBV DNA复阳。HBV-R后，90%（10/11）的患者接受了抗病毒治疗。

在这18个样本中，来自3名不同患者的4个样本（22%）呈HBsAgNx阳性，可能缩短1 - 6个月的诊断时间（从HBsAgNx检测出HBsAg阳性结果到HBsAgQII阳性或HBV DNA可检测出的时间间隔）。

HBsAgQII和HBsAgNx检测在HBV再激活患者中的表现

第三组

回顾性地从8例OBI患者中选择了10个样本，所有样本前期均为HBsAg阴性，HBV DNA阳性，抗-HBc阳性，抗-HBs阴性。

HBsAgQII和HBsAgNx在OBI患者中的表现

第四组

29个样本具有HBV基因型数据，HBsAgQII的检测结果同时采用HBsAgNx和HBsAgQII再次确认。与HBsAgQII相比，在所有基因型样本中HBsAgNx均有更好的检测趋势，但差异无统计学意义。

用两种方法检测不同基因型样本的HBsAg水平

肝霖君有话说

隐匿性HBV感染（OBI）患者通过传统检测方法HBsAg检测不到，但血清/肝脏HBV DNA可检测到。因此，以现有的HBsAg检测方法，HBsAg阴性并不意味着未被感染，其中许多可能为OBI患者。同时，OBI是HBV再激活的主要原因，特别是接受免疫抑制治疗的患者。

以往研究证实HBsAg清除可将慢乙肝患者肝癌发生风险最低化（相关链接一、二），但HBsAg清除后仍存在极低的肝癌发生风险，前期已有研究发现，常规HBsAg检测获得HBsAg清除后仍发生肝癌的慢乙肝患者，通过更高敏的检测方式发现其HBsAg仍可检出（相关链接）。可见，无论是乙肝的诊断，还是临床治愈的监测，都需要更高敏的检测试剂以加强患者的管理。

该研究表明HBsAgNx检测可能有助于OBI及HBV再激活的检测，有利于患者尽早接受积极的抗病毒治疗以追求临床治愈。同时，采用更高敏的HBsAg检测方法也能加强对临床治愈的监测，使患者更接近“完全治愈”，或能进一步提高临床治愈的持久性、降低肝癌发生风险。期待这些高敏检测试剂能尽早广泛应用于临床，助力实现“消除乙肝”的目标。

参考文献：

Bourdin J, Sellier P, Salmona M, et al. Does the ultrasensitive HBsAg Next assay enhance Hepatitis B diagnosis? An evaluation of analytical performances[J]. J Clin Virol, 2024, 174: 105707.