Phytomedicine：加减交气散增强慢性溃疡性结肠炎上皮细胞自噬，抑制TNF触发的细胞凋亡

背景：失调的肠上皮细胞死亡、肠屏障缺陷和随后的炎症反应的恶性循环是慢性溃疡性结肠炎（UC）的核心。中药加减交气散（Modified Jiaoqi Powder，MJQP）已被临床应用于治疗慢性复发型和慢性持续性UC。然而，MJQP在慢性UC中的潜在机制尚不清楚。

目的：探讨MJQP在慢性UC中的有利作用和潜在的分子机制。

方法：采用LC-MS/MS法对MJQP及MJQP药物血清进行化学成分鉴定。通过测量体重、结肠长度、疾病活动指数（DAI）和组织学评分，建立DSS诱导的慢性UC小鼠模型，评价MJQP的疗效。采用酶联免疫吸附法测定血清细胞因子，包括白细胞介素(IL)-1β、IL-12、IL-13、IL-4、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)和IFN-γ。

采用Western blotting、免疫荧光和MTT法分析MJQP对慢性UC小鼠和人上皮细胞系结肠屏障功能的影响。采用TUNEL法、western blotting、流式细胞术检测相关凋亡指标。电镜下观察自噬体和自噬酶体，免疫印迹法和免疫荧光法检测自噬相关蛋白。应用网络药理学方法预测MJQP在UC中的潜在靶点和通路。最后通过免疫组织化学和western blotting检测TNF通路相关蛋白。

结果：MJQP可以阻止UC的进展，表现为体重增加更快，结肠长度更长，组织学评分和DAI较低，炎症因子上调/下调。MJQP干预后，紧密连接蛋白、ki67和E-cadherin的表达呈剂量依赖性增加。此外，MJQP处理对NCM460和Caco2细胞的活性有一定的促进作用，且呈浓度依赖性。MJQP剂量依赖性地降低了TUNEL阳性细胞的比例，并减弱了结肠组织中促凋亡蛋白cleaved-caspase 8和cleaved-caspase 3。流式细胞术还显示MJQP剂量依赖性地减少LPS诱导的NCM460和Caco2细胞的凋亡细胞群。

电镜观察显示，MJQP处理组小鼠自噬体和自溶体明显改善。此外，MJQP处理后，自噬相关蛋白显著表达。网络药理学分析预测MJQP可能通过促进肠上皮细胞增殖和影响TNF相关信号通路来缓解慢性UC。正如预期的那样，在MJQP治疗后，TNF通路相关蛋白在结肠组织中呈剂量依赖性减弱。

结论：这些结果提供了新的治疗策略，表明MJQP可能是一种有希望的治疗慢性UC的候选药物，它通过增强上皮自噬来对抗TNF介导的细胞凋亡，从而促进上皮屏障的恢复。

原始出处：

Liu W, Yan X, An J, Wang X, Mi H, Liu F. Modified Jiaoqi Powder enhances epithelial autophagy against TNF-triggered apoptosis in chronic ulcerative colitis. Phytomedicine. Published online August 28, 2024. doi:10.1016/j.phymed.2024.155996