J Exp Clin Cancer Res：在结直肠癌中，冬凌草甲素通过TP53抑制的TCF4转激活促进内质网应激

背景：结直肠癌发病率和癌症死亡率逐年上升，且发病人群年轻化。中医药治疗在延长结直肠癌患者生存时间和改善预后方面具有独特的效果。据报道，冬凌草甲素(Oridonin)对多种肿瘤具有抗癌作用，但确切的机制仍有待研究。

方法：采用细胞计数试剂盒-8 (CCK8)法、5-乙基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法、Tranwell法和伤口愈合法分别测定细胞增殖、侵袭和迁移能力。Western blot和逆转录定量聚合酶链反应(qRT-PCR)反应各分子蛋白和mRNA的表达水平。转录因子4 (Transcription Factor 4, TCF4)及其靶基因通过位置权重矩阵(Position Weight Matrices, PWMs)软件和基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus, GEO)进行分析。

免疫荧光(IF)观察内质网(ER)应激生物标志物的表达和位置。ER的形态由ER示踪红表征。采用流式细胞仪(FCM)或荧光染色检测活性氧(ROS)水平。采用Fluo-3 AM染色法测定钙离子(Ca²⁺)浓度。采用皮下异种移植物建立胸腺裸鼠模型。

结果：冬凌草甲素抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移，且内质网应激抑制剂的作用呈浓度依赖性减弱。此外，冬凌草甲素诱导的结直肠肿瘤细胞表现为内质网应激生物标志物表达增加，内质网形态松散，囊泡增多，形状不规则。通过PWMs软件和GEO生存分析，TCF4被鉴定为内质网应激的调节因子。

体外和体内实验证实，TCF4抑制内质网应激，减少ROS产生，维持Ca²⁺稳态。此外，冬凌草甲素还能激活TP53，抑制TCF4的反活化，进一步加剧肿瘤细胞中升高的ROS水平和钙离子释放，在体内抑制结直肠癌细胞的肿瘤发生。

结论：冬凌草甲素上调TP53，抑制TCF4反活化，诱导肿瘤细胞内质网应激失调，促进结直肠癌细胞死亡。因此，TCF4可能是肿瘤细胞调节内质网应激，维持蛋白合成稳态的重要节点之一。而对TP53/TCF4轴的抑制在冬凌草甲素的抗癌作用中起着关键作用。

文献来源：

Zhou F, Gao H, Shang L, et al. Oridonin promotes endoplasmic reticulum stress via TP53-repressed TCF4 transactivation in colorectal cancer. J Exp Clin Cancer Res. 2023;42(1):150. Published 2023 Jun 19. doi:10.1186/s13046-023-02702-4