组化解析 | 免疫组化在甲状腺疾病病理诊断中的应用

01 确定甲状腺来源的抗体

TG（甲状腺球蛋白）

▲TG阳性定位于细胞质

TG是由甲状腺滤泡细胞合成的一种糖蛋白，具有较高的组织特异性。TG可以表达在甲状腺滤泡的上皮和胶质，胶质表达比较强。主要用于各种类型的甲状腺癌和转移性腺癌的诊断与鉴别诊断。TG多与降钙素（CT）联合使用，用于甲状腺髓样癌的诊断，髓样癌CT阳性、TG阴性。

 TTF-1（甲状腺转录因子1）

▲TTF-1阳性定位于细胞核

TTF-1表达于甲状腺滤泡上皮、滤泡旁细胞和肺泡上皮细胞胞核中。要注意肺癌（肺腺癌、肺的高分化神经内分泌癌）、其他部位的低分化神经内分泌癌也可表达TTF-1。实际工作中，确定甲状腺分化型癌和肺腺癌时常用标记为TTF-1，其优势在于敏感（强阳性）、且细胞核定位而易于判读；排除转移性肿瘤时，该指标比较有用。与转移性肺腺癌鉴别：需要结合TG和PAX8。与肠癌鉴别时，要注意甲状腺柱状细胞亚型乳头状癌表达CDX-2。确定其他部位的转移癌为甲状腺来源时，建议TTF-1、PAX8联合应用。

PAX-8

▲PAX-8阳性定位于细胞核

PAX-8是核转录调节因子的配对盒子家族成员之一，是一种核蛋白。PAX8在甲状腺、副中肾管、肾脏及卵巢癌等组织中存在表达。与TTF-1一样，几乎100%的甲状腺乳头状癌>90%的滤泡癌及>2/3分化差的甲状腺癌均表达PAX8。PAX8对诊断甲状腺未分化癌非常有价值。

02 标记甲状腺滤泡旁细胞（C细胞）及其肿瘤的标志物的抗体

CT（Calcitonin，降钙素）

▲CT阳性定位于细胞质

降钙素（CT）主要由甲状腺的滤泡旁细胞（C细胞）分泌，其他组织包括肺和肠道中也有表达。CT主要用于甲状腺C细胞增生、甲状腺髓样癌、甲状腺滤泡旁滤泡癌及部分神经内分泌肿瘤的诊断和研究。滤泡上皮来源的肿瘤则不表达CT。

03 标记甲状旁腺及其肿瘤的抗体

PTH：甲状旁腺激素

▲PTH阳性定位于细胞质/膜

甲状旁腺激素（PTH)由甲状旁腺主细胞分泌，主要功能是影响钙与磷的代谢，维持血钙的稳定。由于抗体PTH在甲状旁腺表达的特异性，可用于鉴别甲状腺和甲状旁腺来源的肿瘤，也可用于难以鉴别是否与甲状旁腺有关的转移性肿瘤。

04 鉴别甲状腺良恶性的抗体

CK19

▲CK19阳性定位于细胞质

研究发现，CK19有助于PTC与甲状腺良性乳头增生的鉴别。PTC可以强烈而弥漫地表达CK19。而在正常的甲状腺组织、滤泡性腺瘤、结节性甲状腺肿和乳头状增生中仅部分表达或灶状弱阳性表达CK19，且多为弱阳性。CK19的主要价值在于它对于PTC的高特异性。CK19阴性则可以作为有效的证据用于排除PTC。

CD56

▲CD56阳性定位于细胞膜

CD56在正常滤泡上皮及其良性和肿瘤性病变中呈弥漫性表达，而在乳头状癌中表达下调，具有较高的敏感性和特异性。

HBME-1(MC)

▲HBME-1(MC)阳性定位于细胞膜/质

HBME-1(MC)是一种间皮标志物，在分化型甲状腺癌中高表达，在ATC和良性病变中为阴性或部分表达。HBME-1(MC)是鉴别良恶性病变敏感而准确的标志物，同时联合TPO检测有助于提高诊断甲状腺癌的准确性。

 TPO

▲TPO阳性定位于细胞质

甲状腺过氧化物酶（TPO）表达与滤泡细胞的组织分化和功能相关。研究发现：TPO在甲状腺癌中呈低表达，仅少数病例局部弱阳性表达，而甲状腺良性病变中呈高表达。TPO阴性者诊断为乳头状癌是可靠的。

Galectin-3

▲Galectin-3阳性定位于细胞质

半乳糖凝集素-3(Galectin-3)属于β-半乳糖苷酶结合凝集素家族。正常甲状腺基本为阴性，甲状腺腺瘤绝大部分为阴性，少数可以弱阳性，甲状腺恶性肿瘤中绝大多数为阳性，且为强阳性表达，淋巴结转移甲状腺癌表达要比未转移病例表达要强。近年研究发现其与肿瘤的发生、恶化和恶性转移有关，且被认为是区分甲状腺良恶性肿瘤最有价值的分子标志物之一。

Calectin-3在甲状腺FTC和PTC中高表达，而在ATC或MTC中不表达或弱表达。

E-Cadherin

▲E-Cadherin 阳性定位于细胞膜

在甲状腺癌中E-Cadherin mRNA水平和蛋白表达水平与癌的分化程度呈正相关，表达强度与临床分期呈负相关，是预测肿瘤进展及患者预后的重要指标之一。且在复发和有远处转移的甲状腺癌中，E-Cadherin的表达亦降低或缺失。

05 免疫组化在甲状腺疾病诊断中的应用

1、甲状腺乳头状癌的诊断

甲状腺乳头状癌是甲状腺最为常见的肿瘤，起源于甲状腺滤泡上皮。癌细胞核呈毛玻璃样改变，常见核沟及核内假包涵体，间质内可见砂粒体形成，早期易经淋巴道转移。

推荐免疫组化抗体：TG、TTF-1、PAX-8、CK19、CD56、Galectin-3 、MC、TPO和Ki-67

推荐穿刺细胞学或者组织学结果不确定的患者可以联合分子标志物检测（BRAF、RAS、TERT等）。

2、甲状腺乳头状癌和乳头状增生的鉴别

推荐联合应用CK19、HBME-1(MC)、Galectin-3、TPO、CD56、Ki-67。必要时分子检测BRAF和TERT。

CD56、CK19、HBME-1和Galectin-3联合应用有助于区分良性和恶性乳头状病变。CD56在除乳头状癌以外的正常滤泡上皮及其良性和肿瘤性病变中呈弥漫性表达，而在乳头状癌中表达下调，具有较高的敏感性和特异性。后三种标志物具有较高敏感性，但特异性均较差，染色阴性可用于排除乳头状癌。

值得注意的是，免疫组化（如CK19，Galectin-3，HBME-1）在PTC和良性乳头状增生的鉴别诊断中价值有限。因为这些标志物在桥本甲状腺炎常为阳性。

3、常用甲状腺病理诊断免疫组化表达特性

参考文献：何建芳 韩安家 吴秋良，实用免疫组化病理诊断