Pharm Biol：六味地黄丸通过YAP-自噬轴延缓骨髓间充质干细胞(BMSC)衰老，减轻卵巢切除所致骨质流失

背景：绝经后骨质疏松症(PMOP)是绝经期妇女卵巢变性和雌激素分泌减少引起的一种全身骨骼疾病。POMP的特点是骨微结构恶化，骨脆性增加，临床表现为骨痛和骨折。目前，双膦酸盐和激素替代疗法常用于治疗PMOP，然而这些疗法在治疗期间可能诱发心脏病、癌症和中风等疾病，最终严重限制了治疗的有效性并影响了患者的生活质量。因此，必须确定必要的预防措施，以降低骨折风险和治疗成本。

间充质干细胞(MSCs)来源于胎盘、脂肪组织、牙髓和骨髓等多种组织，具有增殖能力和分化特性。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是临床研究中使用最多的细胞来源之一。大量研究表明，骨髓间充质干细胞在治疗年龄相关疾病方面具有巨大潜力，包括骨质疏松症、皮肤病和糖尿病。PMOP不仅与雌激素缺乏导致破骨细胞活化增强导致骨吸收加速有关，还与雌激素缺乏导致骨髓间充质干细胞衰老导致功能障碍有关。因此，进一步研究骨髓间充质干细胞衰老的机制对治疗PMOP具有重要意义。

六味地黄丸(LWDH)可用于治疗PMOP，多项研究表明LWDH中的有效成分可以促进成骨细胞分化和抑制原代单核细胞的破骨细胞分化，改善卵巢切除(OVX)诱导的小鼠骨质流失等。但目前LWDH对骨质疏松的作用机制尚未得到系统的评估。

该研究旨在探讨LWDH在PMOP中的作用及其机制。

方法：雌性Sprague-Dawley大鼠48只，随机分为假手术组(SHAM)、去卵巢组(OVX)、LWDH高剂量组(LWDH- h, 1.6 g/kg/d)和LWDH低剂量组(LWDH- l, 0.8 g/kg/d);这些剂量是在卵巢切除术后通过灌胃给予的，持续8周。8周后，评估骨微结构。通过成骨和脂肪生成诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化来评估LWDH对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的影响。采用衰老染色、细胞周期分析、实时定量聚合酶链反应和western blotting检测衰老相关生物学指标。最后，评估自噬相关蛋白和Yes相关蛋白(YAP)的表达水平。

结果：LWDH-L和LWDH-H可显著改善OVX诱导的骨质流失。LWDH促进OVX-BMSCs成骨，抑制脂肪生成。此外，LWDH降低了衰老OVX-BMSCs的阳性比例，改善了细胞活力、细胞周期以及p53和p21的mRNA和蛋白水平。LWDH上调OVX-BMSCs中自噬相关蛋白LC3、Beclin1和YAP的表达，下调p62的表达。

结论：该研究首次证明YAP诱导的自噬改变是LWDH延缓OVX中骨髓间充质干细胞衰老的关键因素。该研究揭示了LWDH治疗骨质疏松的分子机制，并证明YAP是治疗骨质疏松的潜在靶点。因此，LWDH激活YAP介导的自噬来延缓BMSC衰老可能是治疗骨质疏松症的一种新的治疗方法。

原始出处：

Liang B, Chen X, Li M, et al. Liuwei Dihuang pills attenuate ovariectomy-induced bone loss by alleviating bone marrow mesenchymal stem cell (BMSC) senescence via the Yes-associated protein (YAP)-autophagy axis. Pharm Biol. 2024;62(1):42-52. doi:10.1080/13880209.2023.2291675